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酶联斑点图像分析仪选型
德国bio-sys品牌bioreader
酶联斑点图像分析仪特点:
可检测普通酶联免yi斑点,还可进行病毒噬斑/空斑等检测;
适用板型6/12/24/48/384孔板和培养皿等
光照调节:自动光照调节,免疫酶斑点试验,可自动获取各种微孔板的图像;
综合质量控制模块,提供符合GLP规范的标准板,并能够使用标准板进行系统自动校验,保证斑点判读标准的一致性
统计学插件:统计分析各孔斑点分布情况、抗原刺激情况、细胞因字分泌情况等
至少包含酶联斑点分析、病毒噬斑等的检测分析功能,符合数据的采集和分析的规范。软件包含触控操作功能;一体化软件,在同一软件中,可同步完成斑点图像扫描、斑点计数与数据分析。
成熟文献1000+,国内使用的近百家。

免疫酶斑点试验解决的问题
ELISPOT 分析仪的出现解决了以下问题:
哪些斑点是抗原特异性 T 细胞产生的(此斑点具有进一步分析价值),哪些是无关细胞产生的(此斑点没有 T 细胞研究价值)
斑点大小的意义
在对不同细胞因子计数和分析时,如何定义斑点MIN和MAX尺寸
如何从单个细胞基础上分析
实验accurate度有多高?如果一个细胞产生相似的细胞因子,在多大程度上会干扰分析结果?
几次重复实验才能使结果更有意义?

免疫酶斑点试验(ELISPOT)的原理是什么呢

(一)原理:细胞受到刺激后局部产生细胞因子,被PVDF膜上特异性单clone Antibody捕获。细胞分解后,再与生物素标记的二抗结合,免疫酶斑点试验厂家,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后,PVDF膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。
(二)ELISPOT与ELISA的区别
1.ELISA通过显色反应,在Microplate reader上测定吸光度,与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。
2.ELISPOT通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数,1个斑点代表1个细胞,从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。
3.由于是单细胞水平检测,免疫酶斑点试验生产厂家,ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏,能从20万~30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。
4.捕获Antibody为高亲和力、高特异性和低内toxin McAb,在研究者以刺激剂activation细胞时,不会影响活化细胞分泌细胞因子。
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