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酶联免疫斑点法技术,免疫斑点检测仪
免疫斑点检测仪是一种用于在单细胞水平上对分泌细胞因子或免疫球蛋白的细胞进行定量的灵敏分析方法。细胞分泌的细胞因子、免疫球蛋白或其他靶蛋白在分泌后立即被特异性Antibody捕获,并在整个刺激过程中被持续捕获。ELISpot可以在25万个细胞中检测出一个有响应的细胞,免疫斑点检测仪,是zui灵敏的细胞分析方法之一。该检测方法稳健且易于操作,因此既适用于大规模试验,也适用于实用研究。ELISpot已被广泛应用于研究感染性疾病、cancer、过敏和自身免疫性疾病的特异性免疫反应,以及特别热门的coronavirus vaccine开发领域。

免疫斑点检测仪实验步骤与原理示意 (示意图如下)
大致原理上分为如下7个步骤,详情已具体产品说明书为准

Step.1 包被:将单clone捕获Antibody添加到乙醇处理的PVDF膜板上
Step.2 细胞孵育:在有刺激的情况下加入细胞,孵育,细胞分泌细胞因子
Step.3 捕获分泌物:activation后的细胞,分泌的细胞因子被周围的Antibody结合捕获
Step.4 检测Antibody:去除细胞,清洗平板,免疫斑点检测仪报价,加入生物素化的检测Antibody
Step.5 链霉亲和素-酶偶联物:加入链霉亲和素偶联物,免疫斑点检测仪供应商,保证后续在膜上形成斑点
Step.6 加反应底物:当酶催化时,显色底物形成不溶性沉淀
Step.7 结果分析:在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞
T细胞的ELISpot分析应用:
B细胞ELISpot分析是分析Antibody免疫反应的有力工具,免疫斑点检测仪厂家,并且是仅有的少数能直接聚焦于Antibody分泌细胞(ASC)的分析方法之一。 这种J为灵敏的方法使研究人员能够识别样品中的ASC,并测量其总数以及那些对特定抗原分泌Antibody的数量。
例如,B细胞ELISpot可以揭示血液中长期记忆B细胞的数量,这是无法用其他方法评估的。B细胞ELISpot的主要应用包括检测B细胞对感染的反应和vaccine引发的反应。


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