单细胞细胞因子分泌生产厂家-单细胞细胞因子分泌-世联博研

单细胞细胞因子分泌（ELISPOT）的原理是什么呢

（一）原理：细胞受到刺激后局部产生细胞因子，被PVDF膜上特异性单clone Antibody捕获。细胞分解后，单细胞细胞因子分泌，再与生物素标记的二抗结合，其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后，PVDF膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。

（二）ELISPOT与ELISA的区别

1.ELISA通过显色反应，单细胞细胞因子分泌生产厂家，在Microplate reader上测定吸光度，与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。

2.ELISPOT通过显色反应，在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点，可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数，1个斑点代表1个细胞，从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。

3.由于是单细胞水平检测，ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏，能从20万～30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。

4.捕获Antibody为高亲和力、高特异性和低内toxin McAb，在研究者以刺激剂activation细胞时，不会影响活化细胞分泌细胞因子。

03单细胞细胞因子分泌免疫学基础研究

根据检测的细胞因子的不同，ELISPOT可以用来区分被activation的不同的T细胞亚群。例如Th1细胞主要分泌IFN-γ，IL-2和TNF-α，而其他一些细胞因子如IL-4，IL-5和IL-13一般是由Th2细胞分泌的。在过敏研究中的一个热点就是采用ELISPOT测定Th2型细胞因子，因为Th2反应是过敏的主要反应，但通常都是低频率岀现，单细胞细胞因子分泌价格，需要高度灵敏方法才能被成功检测到。

04过敏研究

在针对特异反应性过敏的免疫treat中监测T细胞免疫反应；在细胞介导的接触过敏的体外检测诊断的应用中，ELISPOT方法受到越来越多过敏工作者的关注。因为对于像Th2型反应主要细胞因子IL-4这样的一贯很难通过其他方法如 flow cytometry和ELISA检测到的因子来说，应用高灵敏度的ELISPOT方法对于研究过敏原特异性免疫反应显得尤为重要。

ELISPOT斑点分析仪系统

专LI立体3D双光照明系统：增强斑点与背景的对比度，有效抑制板孔侧壁反光造成的“幻影现象”，提高检测精度。唯衣能进行单斑点、每孔光密度测定以定量细胞因字分泌的照明系统。

● 彩色成像及分析系统：

●高灵敏性，高特异性的优点：

●通用性强：适用各种载玻片、35-100mm培养碟、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培养板

●历史悠久，产品成熟度高、文献量大：

30多年历史验证，1500多个实验室成功使用，国内有50多的单位成功使用，无技术和应用风险。