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酶联免疫斑点技术(Enzyme Linked Immunospot Assay,简称ELISPOT)
是细胞免疫学研究中更敏感的检测方法,可以在单细胞水平对Antibody分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK)分泌细胞进行检测,比ELISA和有限稀释法等具有更髙的灵敏性,能从20万-30万细胞中检岀1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的Living cells进行功能性检测,形成分析哪家好,具有较髙的特异性、直观可信度髙,并且易操作,形成分析价格,已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中,在国内外免疫学界获得了广泛的应用。
ELISPOT实验步骤
淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(预包被的)的特异性单抗捕获。去除细胞后,形成分析厂家,BEI捕获的细胞因子与生物素标记的单抗结合,其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色后,PVDF膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了细胞因子,形成分析,通过酶联免疫斑点分析仪(ELISPOT Reader)对斑点的进行自动计数和分析。
T细胞的ELISpot分析应用:
ELISpot是研究特异性免疫反应的敏感方法,能够区分活化的T细胞亚群。例如,Th1细胞产生干扰素-γ、IL-2和TNF-α,而Th2细胞产生其他细胞因子,如IL-4、IL-5和IL-13。例如,这被广泛应用于infectious disease、cancer、过敏和自身免疫性疾病的研究。
在vaccine研究中,ELISpot是一种标准工具,用于通过测量激发强大T细胞反应的能力(通常是干扰素-γ的分泌)来确定vaccine的有效性。基于ELISpot的诊断分析已经可用,包括一种通过测量T细胞对tuberculosis分枝Bacillus特定抗原的反应分泌干扰素-γ来检测tuberculosis病感染患者的测试。
酶联斑Elispot实验系统
世联博研北京科技有限公司是德国BIO-SYS包含bioreader酶联免yi斑点分析仪和biocount病毒菌落计数仪在内全系列产品在中国总授权代理商,为广大科研用户提供BIO-SYS全系列产品提供售前、售中和售后服务
产品成熟,30年历史,1000多家实验室使用,国内近百家单位使用,已成为荧光/Elispot酶联免仪斑点检测分析的金标准。
可以在单细胞水平对抗ti分泌细胞(ASC)及细胞因字(CK分泌细跑进行检测。
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