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酶联免疫斑点技术(Enzyme Linked Immunospot Assay,简称ELISPOT)
是细胞免疫学研究中更敏感的检测方法,可以在单细胞水平对Antibody分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK)分泌细胞进行检测,比ELISA和有限稀释法等具有更髙的灵敏性,能从20万-30万细胞中检岀1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的Living cells进行功能性检测,具有较髙的特异性、直观可信度髙,并且易操作,已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中,在国内外免疫学界获得了广泛的应用。
ELISPOT实验步骤
淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(预包被的)的特异性单抗捕获。去除细胞后,免疫酶联斑点试验生产厂家,BEI捕获的细胞因子与生物素标记的单抗结合,其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色后,PVDF膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了细胞因子,通过酶联免疫斑点分析仪(ELISPOT Reader)对斑点的进行自动计数和分析。
ELISPOT斑点分析仪系统
专LI立体3D双光照明系统:增强斑点与背景的对比度,有效抑制板孔侧壁反光造成的“幻影现象”,提高检测精度。唯衣能进行单斑点、每孔光密度测定以定量细胞因字分泌的照明系统。
● 彩色成像及分析系统:
●高灵敏性,免疫酶联斑点试验厂家,高特异性的优点:
●通用性强:适用各种载玻片、35-100mm培养碟、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培养板
●历史悠久,产品成熟度高、文献量大:
30多年历史验证,1500多个实验室成功使用,国内有50多的单位成功使用,免疫酶联斑点试验价格,无技术和应用风险。
免疫酶联斑点试验解决的问题
ELISPOT 分析仪的出现解决了以下问题:
哪些斑点是抗原特异性 T 细胞产生的(此斑点具有进一步分析价值),免疫酶联斑点试验,哪些是无关细胞产生的(此斑点没有 T 细胞研究价值)
斑点大小的意义
在对不同细胞因子计数和分析时,如何定义斑点MIN和MAX尺寸
如何从单个细胞基础上分析
实验accurate度有多高?如果一个细胞产生相似的细胞因子,在多大程度上会干扰分析结果?
几次重复实验才能使结果更有意义?
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